【求助】溶菌酶破大肠杆菌,半年了没破好 - 经验共享 - 分析测试百 …
这个并不是溶菌酶的问题，有的裂解液是很难直接破菌的。 你可以试试NOVAGEN的bugbuster裂解液，如果自己摸索条件的话，可以考虑其他因素的影响，建议添加EDTA、去垢剂（非离子型的NP40、triton x-100，离子型的脱氧胆酸钠、十二烷基肌氨酸钠、或者SDS等），单独用溶菌酶是 …
【求助】超声破碎的几个问题 - 丁香园论坛 - DXY.cn
每次收集200ml菌液的菌体，然后加入20ml的裂解液（无溶菌酶），超声破碎，冰浴，功率300w，工作3秒，间歇3,但是破碎时间长达40-50min，离心后沉淀中出现黑色的东西。 1：超声前需要用溶菌酶处理吗，多少浓度溶菌酶合适？时间多长？
【求助】关于PMSF的加入时间 - 丁香园论坛 - DXY.cn
溶菌酶、超声共同破碎细菌时，PMSF该与溶菌酶同时加入呢还是30min后超声前加入？同时加入会不会抑制溶菌酶活性？30min后再加会不会再溶菌过程中造成目的蛋白降解？
怎样裂解细菌？ - 丁香园论坛 - DXY.cn
(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 但我个人的经验是:如果你裂解细菌是为了提取蛋白的话,而且蛋白的分子量又小于20kd的话,尽量减少溶菌酶的用量,会引入溶菌酶这种杂蛋白.一般配60ml裂解液用药匙匙柄盛一点就够.判断裂解好坏的标准是,溶液很粘.
关于溶菌酶破壁的问题 - 丁香园论坛
长知识了，ph小于8.0溶菌酶就不能有效工作了，当时我做的时候根本没考虑ph值。 我是做的金葡菌，用480µledta悬浮细菌，溶菌酶用的是超纯水溶解，过夜后，提取dna，结果尚好！ 个人考虑在ph值不适合时，溶菌酶还有功能，但是依然可以达到目的！
【求助】超声破碎时，只有菌液变澄清时才算破碎成功吗？ - 经验 …
作了5管，加溶菌酶后，3管400w，5s，5s，30分钟就变澄清了，可是有两管超了1个小时了（菌好像稍多一些），只是比之前清了些，但仍很混浊。不知道破碎成功没。做了镜检，没太看出区别（未超，超澄清的，超后仍有些浑），微生物功底比较差再问一下，浴
请教用溶菌酶裂解细菌的配方 - 丁香园论坛 - DXY.cn
2.把配制好的10 mg/ml的溶菌酶加入，要求终浓度为1mg/ml。 3.冰上放置30分钟。 4.再加入tritonx-100、Dnase、Rnase。温育十分钟。 5.离心，取上清和沉淀跑电泳鉴别。 注意：我是用Tris-HCl配置的溶菌酶，一定要注意使Tris-HCl PH大于8.0，否则不能正常工作。
【求助】蛋白表达及菌体破碎问题 - 经验共享 - 分析测试百科网
不敢苟同老兄的意见。虽然我用的菌是BL21（DE）plysS ，可以表达少量T7溶菌酶，但它在细胞内部是不能攻击细胞壁的，也就是说它只能在细胞破碎以后才能发挥有限的溶菌效果，这也恰恰是我用这个菌的目的之一。况且你的说法，与我涂平板的结果也不甚相符合。
【求助】原核表达纯化前的菌液处理问题 - 经验共享 - 分析测试百 …
我用的是分子克隆上的方法，溶菌酶处理（我不是3000g离心30min，是根据菌体湿重加细胞裂解缓冲液1，PMSF，溶菌酶，脱氧胆酸，接着搅拌），然后用Triton X-100洗涤包涵体，效果不错。不过我在实验中是加了DNA酶1的。
【求助】超声破碎之前是否应加溶菌酶 - 经验共享 - 分析测试百科 …
出现这样的情况是不是因为我的菌体很多没有破碎完全，所以沉淀中目的蛋白量比较多，这影响判断包涵体表达吗？是不是在超声之前加点溶菌酶会排除这样的误差干扰？加溶菌酶有没有什么不利的因素？感谢各位指导